Suyak iligidan olingan makrofag - Bone marrow-derived macrophage

Suyak iligi makrofag (BMDM) ga tegishli makrofag tadqiqot laboratoriyasida sutemizuvchilardan hosil bo'lgan hujayralar ilik hujayralar.[1][2][3] BMDMlar mavjud bo'lganda etuk makrofaglarga ajralib turishi mumkin o'sish omillari va boshqa signal beruvchi molekulalar.[1][2] Ajralmagan suyak iligi hujayralari borligida kultivatsiya qilinadi makrofag koloniyasini ogohlantiruvchi omil (M-CSF; CSF-1).[3] M-CSF bu a sitokin tarqalishi va majburiyatlari uchun mas'ul bo'lgan o'sish omili miyeloid avlodlar ichiga monotsitlar (keyinchalik makrofaglarga aylanadi).[3][4] Makrofaglar tanadagi turli xil funktsiyalarga ega, shu jumladan fagotsitoz chet el bosqinchilari va boshqa hujayra qoldiqlari, immun reaktsiyalarini qo'zg'atish uchun sitokinlarni chiqarishi va antigen taqdimoti.[2] BMDMlar makrofaglar bilan bog'liq tadqiqotlarni mumkin va moliyaviy jihatdan amalga oshirishda tobora muhim rol o'ynaydigan makrofaglarning ko'p sonli populyatsiyasini ta'minlaydi.[5]

Ishlab chiqarish

In vitro BMDM ishlab chiqarish sxemasi

BMDM ishlab chiqarish uchun, mezenximal ildiz hujayralari sichqonlarning tibia yoki femuridan chiqariladi.[6] BMDMlar suyak iligidan olinganligi sababli, ajratilgan hujayralar donor sichqonlarning holatidan qat'i nazar, sog'lom va sodda (yoki faollashtirilmagan).[5] Olib tashlangandan so'ng, ildiz hujayralari CSF-1 bilan inkubatsiya qilinadi.[6] CSF-1 bo'lmasa, hujayralar faol bo'lmagan holatga kiradi, ammo keyinchalik stimulyatsiya qilingan taqdirda o'sish va farqlanishni qayta boshlashi mumkin.[6] Kiruvchi o'sish omillarini olib kelishi mumkin bo'lgan etuk makrofaglar va fibroblastlar olib tashlanadi.[6] Keyingisi, Il-3 va Il-1, hosildorlikni oshirish va terminalning tez farqlanishini ta'minlash uchun ko'pincha ikkita o'sish omili qo'shiladi.[6] O'sish omillari va boshqa sarumlarni o'z ichiga olgan ekzogen vositalar hujayralarni doimiy ravishda hayotiy qilish uchun qo'shilishi kerak.[6] To'liq o'sish va farqlanish taxminan 5-8 kun davom etadi.[6]

Millionlab BMDMlar bitta sichqonchadan olinishi mumkin va yillar davomida muzlatib qo'yishi mumkin. Eritgandan keyin BMDMlar turli xil ogohlantirishlarga javob berishi mumkin LPS, IFN-γ, PAMPlar, NF-DB va IRF3.[1][5][7] Ushbu signallar sitokinlarni ishlab chiqaradigan genlarning tarjimasini keltirib chiqaradi va makrofaglarning M1 (yallig'lanishga qarshi) yoki M2 (yallig'lanishga qarshi) ekanligini aniqlaydi.[2] Agar BMDMlar muzlatilmasa, ular qarishadi va CSF-1 va ularning muhitida o'sish omillari kamayishi bilan hayotiy kuchga ega bo'lmaydilar.[1]

BMDMlarning ko'payishini bir qator reagentlar ham inhibe qilishi mumkin.[6] Masalan, o'sish va differentsiatsiya CSF-1 va funktsional CSF-1 retseptorlari, tirozin kinaz oila.[6] Funktsional CSF-1 retseptorlari bo'lmasa, ildiz hujayralari CSF-1 stimullariga javob bera olmaydi va shuning uchun farqlay olmaydi; interferonlar CSF-1 retseptorining pastga tushishiga olib kelishi mumkin.[6] Bundan tashqari, M1 yoki M2 ga makrofag kamolotini keltirib chiqaradigan LPS kabi stimullarsiz sichqonlar katta havzani to'plashadi monotsitlar, makrofaglarga xos tadqiqotlar uchun unchalik foydali bo'lmagan makrofaglarning hujayralari[6]

Adabiyotlar

  1. ^ a b v d Barret JP, Kostello DA, O'Sullivan J, Kovli TR, Linch MA (aprel 2015). "Keksa kalamushlardan olingan suyak iligi makrofaglari yallig'lanish stimullariga ko'proq ta'sir qiladi". Neyroinflammatsiya jurnali. 12 (1): 67. doi:10.1186 / s12974-015-0287-7. PMC  4397943. PMID  25890218.
  2. ^ a b v d Li, Yue; Nyu, Shixian; Xi, Dalin; Chjao, Shuqi; Quyosh, Tszyan; Tszyan, Yong; Liu, Tsingxua (2019). "Sichqoncha embrion fibroblastlari va suyak iligidan olingan makrofaglar o'rtasidagi lipopolisaxaridlar ta'siridagi yallig'lanish reaktsiyasidagi farqlar". Interferon va sitokin tadqiqotlari jurnali. 39 (6): 375–382. doi:10.1089 / jir.2018.0167. ISSN  1557-7465. PMID  30990360.
  3. ^ a b v Weischenfeldt J, Porse B (dekabr 2008). "Suyak iligidan olingan makrofaglar (BMM): ajratish va qo'llanilishi". CSH protokollari. 2008 (12): pdb.prot5080. doi:10.1101 / pdb.prot5080. PMID  21356739.
  4. ^ Xemilton, Tomas A .; Chjao, Chenyan; Pavichich, Pol G.; Datta, Shyamasree (2014-11-21). "Miyeloid koloniyani stimulyatsiya qiluvchi omillar makrofag qutblanishini regulyatori sifatida". Immunologiya chegaralari. 5: 554. doi:10.3389 / fimmu.2014.00554. ISSN  1664-3224. PMC  4240161. PMID  25484881.
  5. ^ a b v Marim, Fernanda M.; Silveira, Tatyana N.; Lima, Djalma S.; Zamboni, Dario S. (2010-12-17). "Sichqoncha suyagi iligi hujayralaridan konservalangan saqlanib qolgan suyak iligi makrofaglarini yaratish usuli". PLOS One. 5 (12): e15263. Bibcode:2010PLoSO ... 515263M. doi:10.1371 / journal.pone.0015263. ISSN  1932-6203. PMC  3003694. PMID  21179419.
  6. ^ a b v d e f g h men j k Xyum, D. A .; Allan, V.; Fabrus, B .; Vaydemann, M. J .; Xapel, A. J .; Bartelmez, S. (1987). "Suyak iligidan olingan makrofaglarning ko'payishini tartibga solish". Lenfokin tadqiqotlari. 6 (2): 127–139. ISSN  0277-6766. PMID  3035291.
  7. ^ Oppong-Nonterah, Gertruda O.; Laxdari, Umar; Yamamura, Asami; Xofman, Xol M.; Shahzoda, Lourens S. (2019). "TLR aktivatsiyasi suyak iligidan kelib chiqqan makrofagning farqlanishini o'zgartiradi". Tug'ma immunitet jurnali. 11 (1): 99–108. doi:10.1159/000494070. ISSN  1662-8128. PMC  6296861. PMID  30408777.